追求高(gāo)速和(hé)無與倫比的(de)分離(lí)功能
為(wèi)提高(gāo)實驗室的(de)效率,我們需要告訴的(de)HPLC,而且也需要高(gāo)速HPLC分析得到的(de)分析數據必須像傳統HPLC系統中得出的(de)數據一(yī)樣可(kě)靠。例如(rú),在高(gāo)速LC中進行的(de)1000個分析中,其分離(lí)度必須保持一(yī)個很高(gāo)的(de)水平;對于小體積樣品進樣,保留時間和(hé)峰面積重複性需保持到一(yī)個較好的(de)水平;而且能夠最大限度地(dì)減低(dī)零部件的(de)替換并保持儀器良好的(de)穩定性。
我們目前已可(kě)不依賴高(gāo)壓運行的(de)進行良好的(de)高(gāo)速分離(lí),同時有能提供之前的(de)快速LC系統未能提供的(de)高(gāo)精度及可(kě)擴展性。
超快的(de)速度及高(gāo)分離(lí)效能
Prominence UFLC系統和(hé)新型的(de)反向色譜柱的(de)結合與傳統的(de)HPLC系統相比,速率是其十倍。而且高(gāo)速的(de)樣品進樣機制可(kě)顯著降低(dī)總的(de)分析循環時間。Prominence UFLC的(de)分離(lí)度是傳統HPLC的(de)三倍,因此在傳統HPLC中不易分離(lí)的(de)樣品在新型的(de)系統中充分分離(lí)。
毋庸置疑的(de)高(gāo)精确度—重複性及速率
高(gāo)速LC中的(de)高(gāo)精确度的(de)輸液泵和(hé)自(zì)動進樣器可(kě)改善小體積樣品的(de)重複率,在長(cháng)期穩定性實驗中可(kě)取得并保持高(gāo)重複性。Prominence UFLC擁有超高(gāo)基本性能。
高(gāo)速及高(gāo)分離(lí)柱Shim-pack XR-ODS
基于分離(lí)、耐久因素以及應用壓力的(de)考量,開發出Shim-pack XR-ODS柱。
LC工作站 Labsolutions
島津Labsolution軟件提供高(gāo)通量、儀器控制、多元數據處理(lǐ)以及法規應對等功能,可(kě)提供一(yī)個直觀的(de)、可(kě)操作性強的(de)運行環境。
超快速及高(gāo)分離(lí)性能
液相色譜分離(lí)速率通過應用超細粒徑的(de)分析柱以及增加流動相的(de)流速進而得到增加。當實際檢測時間減少時,分離(lí)循環時間所需的(de)其他因素變的(de)極為(wèi)重要:例如(rú):自(zì)動進樣器進樣所需時間,梯度延遲時間以及系統調節時間。
Prominence UFLC可(kě)提供對于這些因素的(de)解決方式,可(kě)大大降低(dī)總分析時間,由此最終可(kě)提高(gāo)實驗室的(de)效率。
高(gāo)速LC分析—10倍于傳統LC
以下是對一(yī)個新的(de)反相柱—配置了Shim-pack XR-ODS的(de)Prominence UFLC以及配置傳統柱(150mmL. x 4.6mm i.d., 5um)的(de)傳統LC的(de)比較。在傳統LC中,分離(lí)度為(wèi)1.2的(de)苯并熒異構體(峰7與8)的(de)洗脫時間為(wèi)35分鍾,而在配置了Shim-pack XR-ODS的(de)Prominence UFLC中的(de)洗脫時間則為(wèi)3.5分鍾,同時還可(kě)保持同樣的(de)優質分辨率。苯并苝(峰9)的(de)保留時間從傳統中的(de)50.4分鍾減少到另一(yī)個中的(de)5.07分鍾,同時其理(lǐ)論闆數有輕微變化,從10,600 到 11,900。
Prominence UFLC的(de)分析時間減少至傳統LC的(de)1/10,同時還保持了分離(lí)效率。
(根據分離(lí)環境不同,分析時間的(de)減少也會有所不同。)
總分析循環時間減少
在利用高(gāo)速柱進行分析,分析時間減少時,其他影響分析周期的(de)因素變得十分重要,比如(rú)自(zì)動進樣器進樣所需時間,梯度延遲時間以及系統調整時間。如(rú)果自(zì)動進樣樣器進樣時間比較緩慢,則它将占據了總分析循環時間的(de)大部分時長(cháng)。Prominence UFLC內(nèi)配置了一(yī)個快速的(de)自(zì)動進樣器(10秒鍾10uL進樣),提供了極快的(de)分析周期。
就總分析時間的(de)例子(zǐ)進行的(de)連續三個周期的(de)快速分析對比
(假定分析時間:30秒;其他快速LC自(zì)動進樣器進樣活動時間:30秒)
一(yī)系列自(zì)動特征:諸如(rú)自(zì)動排液,通過手動操作縮短(duǎn)啓動時間。在梯度操作時減少色譜柱入口濃度變化的(de)延遲時間;系統調控時間的(de)初始化,UFLC內(nèi)更小的(de)系統體積的(de)應用。
超快速梯度分析
以上的(de)Prominence UFLC展示了優良的(de)梯度分析。下圖所示數據為(wèi)一(yī)個分析周期的(de)30秒左右的(de)高(gāo)速梯度分析。
Prominence UFLC在未應用高(gāo)壓的(de)情況下,通過優化系統及柱體效率提供超高(gāo)速和(hé)高(gāo)分離(lí)。
柱體特征:Shim-pack XR-ODS (30mmL. x 3mm i.d.) 溫度:80°C, 流動相:水/乙腈梯度洗脫液
流速:3.0mL/min
檢測波長(cháng):245nm
樣品:
高(gāo)分離(lí)分析—比一(yī)般分離(lí)高(gāo)出三倍
盡管Shim-pack XR-ODS擁有較小的(de)粒徑填料,但壓降(備壓)較小,而且可(kě)以使用長(cháng)柱子(zǐ)。因此,在未使分析時間變長(cháng)的(de)基礎上,可(kě)取得高(gāo)分離(lí)的(de)具有高(gāo)理(lǐ)論闆數色譜圖,這在以前是從未實現過的(de)。下圖的(de)色譜圖對比了以應用配置了Shim-pack XR-ODS的(de)Prominence UFLC和(hé)傳統LC分别進行的(de)苯并熒蒽異構體的(de)分離(lí)。Prominence UFLC可(kě)提供較短(duǎn)的(de)分析時間以及超高(gāo)的(de)分離(lí)率(Rs),同時3倍的(de)理(lǐ)論闆數。
高(gāo)準确度,穩定性及耐久性
優越重複性是HPLC的(de)重要性能,此性能并不以犧牲高(gāo)速率為(wèi)代價。Prominence UFLC配置了一(yī)個成熟的(de)微沖程溶劑輸送組件(流速分辨率為(wèi)3.7nL/分., 10uL/沖程),擁有改良的(de)硬件由此可(kě)帶來超快的(de)梯度。Prominence自(zì)動進樣器,擁有高(gāo)度密封的(de)測量設備和(hé)高(gāo)精密閥,對于快速LC可(kě)實現高(gāo)重複性。
小體積進樣和(hé)超快速分析的(de)重複性
對普通超快速LC來說,通常小體積進樣的(de)重複性不太好。下圖和(hé)表為(wèi)Prominence UFLC就2uL進樣量的(de)色譜圖,一(yī)分鍾的(de)梯度分析重複性RSD小于0.2%。
柱體特征:Shim-pack XR-ODS (30mmL. x 3mm i.d.) 溫度:80°C, 流動相:水/乙腈梯度洗脫液
流速:1.5mL/分
檢測波長(cháng):245nm
樣品:
(2uL injection, n=6)
對于儀器控制的(de)精确度,是基于分析驗證過程和(hé)質量控制測試要求下進行的(de)。同時為(wèi)了減少系統故障對分析的(de)影響,最為(wèi)重要的(de)控制因素是自(zì)動進樣器上的(de)高(gāo)壓閥。Prominence UFLC應用島津自(zì)身研發的(de)高(gāo)精度的(de)6通閥,在100,000例耐久測試中可(kě)達到小于0.1%或極小的(de)面積重複性(RSD)。
除此之外,LC-MS檢測中,樣品殘留量受到極大的(de)關注。Prominence UFLC通過抑制樣品吸附,成功的(de)實現極小殘留。
島津6通閥耐久性實驗數據
在完成100,000次循環耐久測試後的(de)樣品重複性。
Shim-pack XR-ODS
Shim-pack XR-ODS使用2.2um粒徑填料,極為(wèi)巧秒地(dì)平衡着分離(lí)效率和(hé)壓力。
Shim-pack XR-ODS柱可(kě)以使得高(gāo)速和(hé)高(gāo)分離(lí)分析在低(dī)于30MPa下實現,它是島津在常規柱壓條件下實現高(gāo)速和(hé)高(gāo)分離(lí)的(de)解決方案。
每一(yī)個Shim-pack XR-ODS柱擁有三個質量證書。島津嚴格控制着每一(yī)個色譜柱的(de)質量,依據證書标準生産确保色譜柱的(de)一(yī)緻性。
Shim-pack XR-ODS規格
(mm)內(nèi)徑 | (mm)長(cháng)度 |
2.0 | 30 / 50 / 75 /100 |
3.0 | 30 / 50 / 75 /100 |
4.6 | 30 / 50 / 75 /100 |
對于常規的(de)分析,建議使用3.0mm i.d. 50mm長(cháng)的(de)色譜柱。2.0mm的(de)色譜柱常用于半微量高(gāo)速分析。
PTC氨基酸的(de)應用
柱前衍生方式用于氨基酸的(de)分析--通過使用PITC(苯基異硫氰酸)試劑使氨基酸衍生成PTC(苯氨基硫代甲酰基),并通過UV檢測器檢測。下圖為(wèi)PTC衍生17種種氨基酸中的(de)在4分鍾內(nèi)分離(lí)分析圖。
柱:Shim-pack XR-ODS (75mmL. x 3mm i.d.)
溫度:40℃
流動相:磷酸鹽緩沖液/乙腈溶液,梯度洗脫
流速:1.2 mL/min
檢測波長(cháng):254nm
黃豆中大豆異黃酮的(de)分析
大豆異黃酮為(wèi)黃豆中富含的(de)物質,尤其是大豆胚芽中。由于其類似雌激素的(de)作用,大豆異黃酮引起了廣泛的(de)關注。通過梯度洗脫可(kě)分析黃豆中的(de)大豆異黃酮。
柱:Shim-pack XR-ODS (75mmL. x 3mm i.d.)
溫度:40℃
流動相:甲酸水溶液/甲酸乙腈溶液,梯度洗脫
流速:1.2 mL/min
檢測波長(cháng):275nm